阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)是引起新生兒敗血癥、腦膜炎和壞死性小腸結(jié)腸炎的條件致病菌,感染后死亡率高達(dá)80%。實(shí)驗(yàn)采用雙層瓊脂擴(kuò)散法從淡水魚腸道(19 株)和泡菜(7 株)中篩選出1 株來源于鯉魚腸道的對(duì)Enterobacter sakazakii(106 CFU/mL)具有較強(qiáng)拮抗作用的乳酸菌菌株LY-4。結(jié)果表明,抑菌活性物質(zhì)存在于乳酸菌無細(xì)胞上清液(cell free supermatant,CFS)中,抑菌最佳培養(yǎng)時(shí)間為28 h。CFS經(jīng)胃蛋白酶處理可完全喪失抑菌活性,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶處理后抑菌活性降至76.44%和54.38%,對(duì)α-淀粉酶不敏感;在pH 3.0~4.5范圍內(nèi)保持抗菌活性穩(wěn)定;經(jīng)40~80 ℃范圍內(nèi)處理2 h后其拮抗活性基本不變,100 ℃和121 ℃處理2 h后活性降至79.57%和75.71%。初步判定菌株LY-4產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)為非糖基化類細(xì)菌素,并篩選出初步純化抑菌物質(zhì)的最佳萃取劑為乙酸乙酯,粗提物的最小抑菌濃度為6.0 mg/mL。經(jīng)生理生化和16S rDNA鑒定為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。
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