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一種基于多重實(shí)時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)熔解曲線分析的肉及肉制品摻假鑒別方法
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 145 發(fā)表時間: 2017-07-24
作者: 周?彤,李家鵬,李金春,喬曉玲,黃?鑫,陳?曦,楊君娜,郭?雅
關(guān)鍵詞: 肉類摻假;多重實(shí)時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);熔解曲線分析;SYBR?Green染料;動物源性成分
摘要:

為實(shí)現(xiàn)肉及肉制品摻假快速鑒別,分別以豬、牛線粒體DNA的COXⅠ,綿羊、山羊、狗、狐貍、貉線粒體DNA的16S rRNA及雞、鴨線粒體DNA的12S rRNA基因?yàn)榘形稽c(diǎn),設(shè)計(jì)擴(kuò)增產(chǎn)物熔解溫度(Tm值)具有顯著性差異的特異性引物,建立一種用于快速鑒別肉或肉制品中豬、牛、綿羊、山羊、雞、鴨、狗、狐、貉9?種源性成分的5重實(shí)時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)熔解曲線分析方法,通過特異性、靈敏度及市售樣品的檢測,對該方法進(jìn)行檢驗(yàn)和評價。結(jié)果表明:方法具有良好的特異性及靈敏度,單物種DNA檢出限為0.001~1?ng,多物種混合DNA檢出限均為0.1?ng,通過市售樣品檢測表明該方法可用于實(shí)際樣品(包括生鮮樣品和熟制樣品)摻假的快速鑒別。

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