領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：針對(duì)不同果蔬表面建立星狀病毒富集與RNA提取方法，結(jié)合已報(bào)道的實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）引物和探針，實(shí)現(xiàn)果蔬中星狀病毒的高靈敏快速定量檢測(cè)。方法：利用10 倍梯度稀釋的星狀病毒cRNA分子檢測(cè)Ct值及其對(duì)應(yīng)的初始濃度，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，為星狀病毒的定量檢測(cè)提供參考。將ISO/TS 15216-2:2013針對(duì)果蔬中諾如病毒和甲肝病毒RNA的提取方法用于星狀病毒的檢測(cè)，利用人工感染的大白菜和草莓樣品，分析病毒回收率、靈敏度及檢測(cè)重復(fù)性。最終通過60?份果蔬樣品的檢測(cè)驗(yàn)證該方法的實(shí)用性。結(jié)果：所建立的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法擴(kuò)增效率達(dá)95.9%，檢測(cè)低限為5.6?拷貝/反應(yīng)。人工感染的大白菜樣品中病毒回收率在0.94%～9.63%之間，而人工感染草莓樣品中病毒回收率最高達(dá)1.03%。對(duì)同一感染濃度的樣品在不同時(shí)間的檢測(cè)結(jié)果變異系數(shù)均小于2%。最終檢出1?份來自北京農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的草莓樣品為星狀病毒陽性，檢測(cè)陽性率達(dá)1.67%。結(jié)論：建立的果蔬中星狀病毒熒光RT-PCR定量檢測(cè)方法快速、高效、靈敏，在食源性病毒的日常篩查和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
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