領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
基于酸性木聚糖酶在飼料及釀酒行業(yè)良好的應(yīng)用前景，通過基因組步移的方法克隆得到微紫青霉酸性木聚糖酶的全長(zhǎng)基因xynA，然后采取重疊延伸PCR技術(shù)進(jìn)行內(nèi)含子的切除獲得xynA的cDNA序列，并對(duì)其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。序列分析結(jié)果顯示xynA基因全長(zhǎng)720?bp，內(nèi)含子63?bp，cDNA全長(zhǎng)657?bp。推測(cè)該木聚糖酶編碼信號(hào)肽28?個(gè)氨基酸，成熟肽190?個(gè)氨基酸；預(yù)測(cè)該蛋白為分子質(zhì)量20.61?kD、等電點(diǎn)7.0的親水性蛋白，且分子內(nèi)不含二硫鍵。與其他真菌來源的GH11族耐酸性木聚糖酶進(jìn)行序列比對(duì)，結(jié)果顯示該酶的相應(yīng)位置具有特征天冬氨酸殘基Asp，且具有糖苷水解酶11?族的保守區(qū)域特征以及典型的“右手半握”狀結(jié)構(gòu)，重組木聚糖酶基因xynA能夠在大腸桿菌中成功表達(dá)，比酶活力達(dá)220.5?U/mg。
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