領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
納豆激酶由納豆芽孢桿菌（Bacillus subtilis natto）的aprN基因編碼，在體內(nèi)外具有很強的溶解纖維蛋白活性。利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）技術(shù)擴增B. subtilis natto的aprN基因，并依據(jù)B. subtilis的密碼子偏好性優(yōu)化了起始30 個氨基酸的密碼子，構(gòu)建了重組表達質(zhì)粒pHT01-aprN。經(jīng)限制性酶酶切、PCR擴增和測序驗證了其編碼的正確性。通過電擊法將含有強啟動子的pHT01-aprN導(dǎo)入B. subtilis，利用氯霉素抗性篩選獲得B.s 168/pHT01-aprN工程菌。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達，搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)最高酶活力為（289.00±3.42） U/mL，是野生菌的3.9 倍，酶活力表達穩(wěn)定性良好。
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