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—— 中國食品雜志社
在單核細胞性李斯特菌（Listeria monocytogenes）野生株EGDe actA及inlB雙基因缺失株（EGDe ΔactAΔinlB）的基礎上，利用同源重組的方法進一步構(gòu)建了缺失營養(yǎng)基因dal的菌株（EGDe ΔactAΔinlBΔdal），并對該缺失菌株生長狀態(tài)、毒力基因表達水平、生物被膜的形成量及細胞侵襲等方面作進一步分析。結(jié)果顯示，37?℃搖床培養(yǎng)6?h后，缺失株的菌濃度顯著低于EGDe?ΔactAΔinlB（P＜0.001），培養(yǎng)基中補充D-丙氨酸的缺失株生長速率與親本株相比無顯著差異；實時熒光定量聚合酶鏈式反應結(jié)果顯示，缺失株的sigB基因表達水平變化最明顯（P＜0.01），約下調(diào)90%；缺失株生物被膜形成量顯著增加（P＜0.05），培養(yǎng)基補充D-丙氨酸后缺失株生物被膜的生成量與親本株相比無差異；對Coca-2細胞的侵襲無影響，表明該基因?qū)毦L能力及生物被膜形成具有重要的調(diào)控作用，并不影響菌株對細胞的侵襲力。此缺失株的構(gòu)建為進一步研究基因dal的功能提供了理論支持。
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