領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：探討山楂原花青素（hawthorn procyanidins，HPC）誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞Huh-7增殖和促進(jìn)其凋亡的機(jī)制。方法：體外常規(guī)培養(yǎng)Huh-7細(xì)胞株和過表達(dá)Traf6基因Huh-7細(xì)胞株，配制0、5、10、20、40、80 μg/mL不同質(zhì)量濃度的HPC，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)8（cell counting kit-8，CCK-8）試劑盒檢測HPC對(duì)Huh-7細(xì)胞和過表達(dá)Traf6基因Huh-7細(xì)胞增殖的抑制作用，并選40 μg/mL作為HPC實(shí)驗(yàn)質(zhì)量濃度；利用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測Huh-7細(xì)胞中Traf6、NF-κB p65、Bax和Caspase-3的mRNA表達(dá)水平；利用蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western blot）檢測Huh-7細(xì)胞中Traf6、NF-κB p65、Bax和Caspase-3蛋白表達(dá)水平；利用Annexin V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒檢測HPC對(duì)Huh-7細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：HPC質(zhì)量濃度大于20 μg/mL時(shí)可以明顯抑制Huh-7細(xì)胞增殖，并隨HPC質(zhì)量濃度升高Huh-7細(xì)胞的相對(duì)存活率顯著降低（P＜0.05）；Traf6蛋白過表達(dá)可以促進(jìn)Huh-7細(xì)胞的增殖。與空白對(duì)照組比較，40 μg/mL的HPC可以顯著抑制腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（tumor necrosis factor receptor associated factor 6，Traf 6）和核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB） p65 mRNA和蛋白表達(dá)（P＜0.05），顯著增強(qiáng)Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)（P＜0.05），顯著促進(jìn)Huh-7細(xì)胞的凋亡（P＜0.05）。結(jié)論：HPC可以通過下調(diào)Traf6/NF-κB信號(hào)通路誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡。
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