領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
本實(shí)驗(yàn)以海南產(chǎn)番木瓜為研究對(duì)象，采取鹽析法聯(lián)合離子液體雙水相對(duì)其富含的木瓜蛋白酶進(jìn)行提取純化。以不同飽和度的(NH4)2SO4對(duì)粗酶液進(jìn)行鹽析，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，確定了以飽和度分別為20%和45%的兩步鹽析法的最佳條件。然后再進(jìn)行雙水相萃取，通過單因素試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)3因素3水平的響應(yīng)面試驗(yàn)，優(yōu)化雙水相萃取條件為離子液體[C4mim]N(CN)2質(zhì)量分?jǐn)?shù)29.76%、(NH4)2SO4質(zhì)量分?jǐn)?shù)16.08%、pH?8.18，在此最優(yōu)條件下木瓜蛋白酶萃取率為89.01%，酶活力回收率為86.72%，所得到木瓜蛋白酶比活力為1?056?U/mg，純化倍數(shù)達(dá)到9.6?倍。然后對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，經(jīng)純化的酶中雜條帶明顯減少，驗(yàn)證了分離純化的效果。
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