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免疫親和層析技術(shù)協(xié)同酶聯(lián)免疫吸附法檢測赭曲霉毒素A
來源:導(dǎo)入 閱讀量: 102 發(fā)表時間: 2024-06-24
作者: 張?zhí)N哲,張先舟,袁耀武,張偉
關(guān)鍵詞: 免疫親和層析技術(shù);酶聯(lián)免疫吸附法;檢測;赭曲霉毒素A
摘要:

利用免疫親和層析技術(shù)(immunoaffinity chromatography,IAC)對樣品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)進(jìn)行捕獲與濃縮,利用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法對IAC捕獲的目標(biāo)物OTA進(jìn)行測定。IAC與ELISA中的抗OTA單克隆抗體來自不同的克隆株,分屬不同獨(dú)特型,與OTA結(jié)合靶點(diǎn)的選擇性存在差異,IAC與ELISA協(xié)同檢測,可以有效過濾OTA結(jié)構(gòu)類似物造成的干擾,提高免疫分析的特異性與靈敏度。該方法用于加標(biāo)樣品測定時,OTA的檢出限為0.2 ng/g,定量限為0.4 ng/g,OTA的平均回收率為75.9%,與單一的ELISA法相比,該方法雖然回收率略低,但靈敏度可以顯著提高,達(dá)到ELISA法的60 倍。通過對49 份樣品的實(shí)際檢測,該方法檢出陽性樣品與國標(biāo)法的符合率達(dá)到100%,漏檢率為0%,由此可見,該方法在準(zhǔn)確性上表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。作為一種綜合免疫分析技術(shù),該方法不需要大型儀器設(shè)備,對操作環(huán)境沒有嚴(yán)格要求,便于基層實(shí)驗(yàn)室對樣品中OTA的分析。

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