領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
從芝麻中提取總RNA，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)得到芝麻蛋白Ses i 3基因，構(gòu)建pET-22b(＋)質(zhì)粒表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞宿主表達(dá)菌中誘導(dǎo)表達(dá)，經(jīng)鎳離子親和層析柱獲得純品目的蛋白。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示目的蛋白分子質(zhì)量約為66 kDa。進(jìn)而采用BALB/c小鼠過(guò)敏模型評(píng)價(jià)重組Ses i 3蛋白與天然Ses i 3蛋白誘發(fā)小鼠芝麻過(guò)敏反應(yīng)的差別，通過(guò)測(cè)定相關(guān)過(guò)敏性指標(biāo)（特異性抗體羊抗鼠免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）E、IgG1和IgG2a；細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5、干擾素-γ和組胺）發(fā)現(xiàn)，重組蛋白Ses i 3誘發(fā)小鼠芝麻過(guò)敏的能力與天然Ses i 3蛋白相似。因此，本研究通過(guò)原核表達(dá)系統(tǒng)獲得重組的芝麻重組蛋白Ses i 3，并證實(shí)其與天然Ses i 3蛋白具有相似的免疫活性，可以用于后續(xù)的芝麻致敏性研究。
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