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—— 中國食品雜志社
為深入挖掘藻渣的高附加值，本實驗開展雨生紅球藻抗氧化肽的制備和活性研究。將雨生紅球藻蛋白酶解物作為原料，以2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）陽離子自由基清除力為活性跟蹤指標，通過超濾、制備型和分析型高效液相色譜，純化制備抗氧化多肽組分；經(jīng)高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法鑒定氨基酸序列，同時采用分子對接技術篩選并確定雨生紅球藻抗氧化肽，并揭示作用機理；基于秀麗隱桿線蟲模型，評價藻多肽的體內(nèi)抗氧化活性。結(jié)果表明，雨生紅球藻多肽組分的抗氧化能力經(jīng)分離后提高2.96 倍，選擇自由基清除力最強的組分i（0.25 mg/mL時ABTS陽離子自由基清除率（96.97±2.00）%）進行結(jié)構(gòu)鑒定，獲得10 條多肽序列i-1～i-10；分子對接結(jié)果顯示，i-1與ABTS陽離子自由基的最小結(jié)合自由能最低，表明其抗氧化能力最強，確定新型雨生紅球藻抗氧化肽（Haematococcus pluvialis antioxidant peptide，HPp）序列為KFTPAP。體內(nèi)實驗表明，HPp能有效改善秀麗線蟲的抗氧化能力（P＜0.05），包括超氧化物歧化酶、過氧化氫酶活力及丙二醛含量，且在100 μmol/L時效果最佳。推測C端聚集疏水性氨基酸、含有苯丙氨酸和來源于葉綠素蛋白，可能是HPp具有較強抗氧化能力的原因。研究結(jié)果為雨生紅球藻藻渣的高值化利用提供理論指導，并為食源性抗氧化劑的開發(fā)提供思路。
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