Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1是一種對粉紅單端孢(Trichothecium roseum)具有很強抑菌作用的肽,但其抑菌機理尚不明確。本研究從細(xì)胞膜通透性、蛋白合成和核酸合成3 方面研究其抑菌機理。通過大分子釋放量和電導(dǎo)率研究抗菌肽P-1對粉紅單端孢細(xì)胞膜通透性的影響;經(jīng)胞內(nèi)蛋白含量測定及胞內(nèi)蛋白十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析研究抗菌肽P-1對蛋白合成的影響;采用瓊脂糖凝膠電泳和熒光光譜分析抗菌肽P-1對粉紅單端孢DNA的凝膠阻滯作用及與溴化乙錠(ethidium bromide,EB)競爭性結(jié)合作用,并通過DNA和RNA相對含量來研究粉紅單端孢核酸合成是否受到抑制。結(jié)果表明:抗菌肽P-1可引起粉紅單端孢細(xì)胞膜通透性增加,胞內(nèi)電解質(zhì)和大分子物質(zhì)外泄;同時,菌體蛋白合成受到抑制,尤其對分子質(zhì)量在43.0~97.4 kDa之間的蛋白最為明顯;抗菌肽P-1對DNA沒有明顯阻滯作用,但其能與EB競爭性結(jié)合DNA,使核酸合成受到抑制,導(dǎo)致菌體代謝紊亂,影響蛋白質(zhì)的正常表達(dá),進(jìn)而起到抑菌作用。
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