領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
建立賴解旋酶恒溫基因擴(kuò)增（helicase-dependent isothermal DNA amplification，HDA）快速檢測(cè)發(fā)酵乳中 葡萄糖桿菌的方法。選擇葡萄糖桿菌ITS基因序列（基因號(hào)為KF896260.1）為目的基因，設(shè)計(jì)特異性引物，并優(yōu)化 反應(yīng)體系中UvrD解旋酶和T4 gp32的添加量，建立最優(yōu)反應(yīng)體系。采用建立的HDA體系對(duì)多種菌株進(jìn)行擴(kuò)增和電泳 檢測(cè)，驗(yàn)證方法特異性，通過HDA法直接檢測(cè)發(fā)酵乳中的葡萄糖桿菌，并確定其檢出限。結(jié)果表明：采用HDA法 檢測(cè)發(fā)酵乳中葡萄糖桿菌，反應(yīng)體系中UvrD解旋酶和T4 gp32的適宜添加量分別為0.10 μg和5.0 μg，擴(kuò)增產(chǎn)物與設(shè) 計(jì)序列長(zhǎng)度（309 bp）一致，特異性良好，檢出限為4.3×101 CFU/g。該方法用于檢測(cè)發(fā)酵乳中葡萄糖桿菌的靈敏 度高、耗時(shí)短。
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