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副溶血性弧菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)模板的構(gòu)建和檢測(cè)方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 239 發(fā)表時(shí)間: 2013-02-19
作者: 陳剛,邵彪,許蓓蓓,季葛振
關(guān)鍵詞: 副溶血性弧菌;標(biāo)準(zhǔn)模板;實(shí)時(shí)熒光定量PCR;Taqman探針
摘要:

目的:構(gòu)建肉制品副溶血性弧菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)陽性模板和檢測(cè)方法。方法:以副溶血性弧菌toxR基因上特異性片段為目標(biāo),設(shè)計(jì)并合成引物及Taqman探針,將目標(biāo)片段連接到PGM-T載體上構(gòu)建重組質(zhì)粒,建立實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)體系,并考察方法的靈敏性、特異性、重復(fù)性和準(zhǔn)確性。結(jié)果:構(gòu)建出副溶血性弧菌熒光定量PCR檢測(cè)方法的標(biāo)準(zhǔn)模板并建立了相應(yīng)的檢測(cè)方法,獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=-3.151 lgX+42.86,靈敏度40c...

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