領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
通過體外實驗探究purR、purL基因?qū)χ参锶闂U菌（Lactobacillus plantarum）KLDS1.0391細(xì)菌素合成是否具有直接調(diào)控作用。基于植物乳桿菌KLDS1.0391全基因組序列，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增得到PurR和PurL蛋白的編碼基因，構(gòu)建原核表達(dá)載體，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌M15中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，采用鎳柱親和層析法純化得到目的蛋白，透析后超濾濃縮，通過凝膠阻滯實驗以及生物膜干涉技術(shù)研究兩種蛋白與菌株細(xì)菌素合成調(diào)控區(qū)域是否具有結(jié)合作用。結(jié)果表明，PurR蛋白以可溶性蛋白形式存在，PurL蛋白以包涵體蛋白形式存在，純化后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示條帶單一，達(dá)到電泳純，經(jīng)過濃縮后PurR蛋白質(zhì)量濃度為0.74 mg/mL，PurL蛋白質(zhì)量濃度為3.8 mg/mL。凝膠阻滯實驗以及生物膜干涉技術(shù)結(jié)果表明，2 個重組蛋白與菌株細(xì)菌素合成基因的啟動子在菌體外無直接的結(jié)合作用，對于兩種蛋白對細(xì)菌素合成的調(diào)控是否屬于間接調(diào)控作用以及在菌體內(nèi)的調(diào)控情況，需進(jìn)一步研究。
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