從傳統(tǒng)臘肉中篩選拮抗菌株,純化鑒定新型抗菌物質(zhì)并對(duì)其抗菌特性研究,為抗菌脂肽在食品防腐中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。采用抑菌圈法篩選拮抗菌株;通過(guò)酸沉淀、硅膠柱層析和半制備反相高效液相色譜分離純化抗菌脂肽;通過(guò)傅里葉紅外光譜、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)脂肽鑒定。結(jié)果表明,篩選得到12?株拮抗細(xì)菌,其中菌株XLP27對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌以及對(duì)1?株酵母菌和4?株霉菌有明顯抑菌作用。拮抗菌株XLP27鑒定為短小芽孢桿菌,其抗菌物質(zhì)主要在穩(wěn)定期合成,并在發(fā)酵60?h時(shí)達(dá)到最大產(chǎn)量。分離純化得到單一組分抗菌物質(zhì),并鑒定為環(huán)狀脂肽Iturin?A,其由m/z?1?046.182、1?060.213、1?074.198、1?088.201和1?102.175的5?個(gè)同系物組成,對(duì)應(yīng)脂肪酸鏈長(zhǎng)度C14~C18。脂肽具有極高的熱穩(wěn)定性,在40~100?℃下保溫30?min活性基本保持不變,在較寬的pH值范圍(4~10)內(nèi)穩(wěn)定性好,且對(duì)所有蛋白水解酶不敏感。菌株XLP27所產(chǎn)抗菌物質(zhì)主要是脂肽Iturin?A,具有廣譜抑菌活性,穩(wěn)定性良好,有潛力在食品保鮮和農(nóng)業(yè)生物防治領(lǐng)域替代傳統(tǒng)抗菌劑使用。
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