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重組醇醛脫氫酶的分離純化及性質(zhì)研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 138 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 謝莉, 張鐸, 郭會(huì)燦, 張麗萍, 李曼, 趙寶華
關(guān)鍵詞: 重組醇醛脫氫酶; 基因工程菌; 分離純化; 酶學(xué)性質(zhì);
摘要:

基因工程菌Y517#能表達(dá)醇醛脫氫酶,將L-山梨糖轉(zhuǎn)化為VC的前體2-酮基-古龍酸(2-KGA)。通過超聲波破碎菌體、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE Sepharose FastFlow陰離子交換層析,Q Sepharose High Performance柱層析等過程,從Y517#發(fā)酵液中分離純化了重組醇醛脫氫酶,純化倍數(shù)為11倍。研究發(fā)現(xiàn),該酶分子量為66kD,最適作用溫度為40℃,對(duì)熱不穩(wěn)定,在60℃下保溫10min酶活力完全喪失。最適pH值為7.0,pH穩(wěn)定范圍為6.0~9.0。

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