領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
N-乙酰鳥(niǎo)氨酸脫酰基酶(N-acetylornithine deacetylase,NAOase)為新型氨基酸拆分酶,可在重組菌BL21(DE3)-pET22b-argE中胞內(nèi)誘導(dǎo)表達(dá)。為降低生產(chǎn)成本并提高酶活,優(yōu)化了培養(yǎng)基成分及誘導(dǎo)條件。結(jié)果表明,進(jìn)口的蛋白胨和酵母膏明顯優(yōu)于國(guó)產(chǎn)原料。5.0g/L的乳糖可以代替昂貴的IPTG(isopropy1β-D-1-Thiogalacto pyranoside,異丙基β-D硫代半乳糖苷)起到有效的誘導(dǎo)效果。最佳碳源為1.0g/L甘油,氮源為15.0ml/L玉米漿和5.0g/L蛋白胨。NAOase大多以不可溶的包涵體形式表達(dá),少量為可溶的活性表達(dá)。降低誘導(dǎo)溫度可增大活性表達(dá)的比例,而整菌表達(dá)量也隨之降低。22℃誘導(dǎo)10h為活性表達(dá)的最適條件,生物量為6.91,酶活為392.65U/ml,分別為優(yōu)化前的1.65倍和5.72倍。
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