
以殼聚糖微球?yàn)檩d體,戊二醛為交聯(lián)劑,固定β- 半乳糖苷酶對(duì)β- 半乳糖苷酶的固定化條件及固定化酶的各種性質(zhì)進(jìn)行研究,確定酶固定的最適條件為:用pH6.5 的P-E-M 緩沖液浸泡10h,25℃殼聚糖微球與0.5% 戊二醛交聯(lián)12h 以上,4℃下酶與殼聚塘微球固定12h 以上,酶活力回收率可達(dá)67%。固定化酶的最適溫度為40℃左右,最適pH7.0。通過(guò)雙倒數(shù)法求回歸方程,求得酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)Km 值為0.613 mmol/ml。固定化酶穩(wěn)定性好,可以重復(fù)使用。將該固定化酶應(yīng)用于乳糖分解實(shí)驗(yàn)和作為柱層析介質(zhì)連續(xù)分解乳糖,分批反應(yīng)6 批次,乳糖水解率保持在90% 以上,連續(xù)水解20d,乳糖水解率仍然可保持在75% 以上。
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