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—— 中國食品雜志社
為研究大蒜油的抗凝血作用，本實驗從大蒜中分離提取大蒜油，經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀鑒定該大蒜油中主要成分為二烯丙基硫醚（allyl sulfide，DAS）、二烯丙基二硫醚（diallyl disulfide，DADS）和二烯丙基三硫醚（diallyl trisulfide，DATS）。體外實驗結(jié)果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS均具有部分抑制凝血酶活性功能，且抑制作用由強(qiáng)到弱依次為DATS＞大蒜油＞DADS＞DAS。利用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法進(jìn)行酶動力學(xué)分析，結(jié)果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS對凝血酶的抑制作用屬于混合性抑制（競爭性和非競爭性抑制）。分子熒光光譜分析結(jié)果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS能與凝血酶蛋白中的發(fā)色基團(tuán)相互作用導(dǎo)致熒光猝滅。三維分子對接分析結(jié)果顯示出DATS與凝血酶結(jié)合性能良好；二維分子對接分析結(jié)果顯示出DATS與凝血酶蛋白活性位點(diǎn)處Asp189、Gly219和Ala190形成氫鍵，與酶活性位點(diǎn)的Gly216、Ser195、Trp215形成疏水作用力，體現(xiàn)競爭性抑制作用，與非活性位點(diǎn)Gly226、Asp221A、Tyr225、Glu217、Cys191、Val213形成疏水作用，體現(xiàn)非競爭性抑制作用。體內(nèi)實驗結(jié)果表明，大蒜油、DAS、DADS、DATS分別通過正向調(diào)控大鼠凝血四項指標(biāo)而直接展現(xiàn)出抗凝血功能，且抗凝血能力依次為DATS＞DADS＞DAS＞大蒜油。大鼠體內(nèi)抗氧化實驗結(jié)果表明大蒜油、DAS、DADS、DATS均只有微弱抗氧化能力，大蒜油、DAS、DADS、DATS具有的抗凝血功能應(yīng)與其抗氧化能力不相關(guān)。
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