領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：通過人工抗原的構(gòu)建，制備抗羥基紅花黃色素A(HSYA)的特異性抗血清。方法：采用直接合成法將HSYA 與牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的共價(jià)偶聯(lián)，分別合成免疫抗原HSYA-BSA 和包被抗原HSYAOVA，并進(jìn)行相關(guān)鑒定；用合成的人工抗原免疫家兔，制得抗羥基紅花黃色素A 的特異性抗血清，采用酶聯(lián)免 疫法鑒定。結(jié)果：根據(jù)建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算得HSYA 和BSA 的結(jié)合比是50:1，HSYA 和OVA 的結(jié)合比是112.8:1；理想的包被抗原的濃度為4μg/ml，抗血清和二抗的工作濃度分別為1:200 和1:2000；交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，該抗體與蘆丁、金合歡素的反應(yīng)率均接近于零；親和性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在0.25～2μg/ml 濃度范圍內(nèi)，抑制率與濃度呈線性關(guān)系，線性回歸方程為y= － 16.213lgx+102.47(r=0.9575)，抑制中濃度IC50 為1.5μg/ml，最低檢測(cè)限為0.250μg/ml。結(jié)論：通過直接偶聯(lián)法可以成功制備出具有抗羥基紅花黃色素A 的特異性抗血清。
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