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苯甲酸人工抗原的合成與免疫效價(jià)的測(cè)定
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 155 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 趙 偉,魏晨曦,夏 瑩,楊 旭,丁書茂,袁均林*
關(guān)鍵詞: 苯甲酸|鄰苯二甲酸酐|人工抗原|抗體
摘要:

通過苯甲酸的衍生物鄰苯二甲酸酐(PA)的氨解法將苯甲酸(BA)偶聯(lián)到載體蛋白上合成苯甲酸的人工抗原:免疫原苯甲酸- 雞卵清蛋白(BA-OVA)和包被原苯甲酸- 牛血清白蛋白(BA-BSA)。通過紫外光譜掃描、紅外光譜掃描及SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法檢測(cè)鑒定人工抗原,并用免疫原(BA-OVA)免疫BALB/c 小鼠,檢測(cè)抗體的生成。結(jié)果表明,苯甲酸人工抗原的合成成功。根據(jù)鄰苯二甲酸酐、人工抗原和載體蛋白的紫外吸收值,計(jì)算出免疫原中苯甲酸(BA)與載體雞卵清蛋白(OVA)的偶聯(lián)比約為174:1。免疫小鼠血清中的抗體通過ELISA法檢測(cè)為陽(yáng)性(血清效價(jià)達(dá)到了1: 3.2 × 105),表明合成的抗原已誘導(dǎo)出針對(duì)苯甲酸的特異性抗體生成,為進(jìn)一步的苯甲酸單克隆抗體制備和免疫檢測(cè)提供可靠的免疫原。

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