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用于轉(zhuǎn)基因檢測(cè)的水果果肉總DNA提取法
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 段婧婧,肖琳,陳軍
關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)基因|水果|DNA提取
摘要:

本研究以木瓜等水果果肉為實(shí)驗(yàn)材料,對(duì)改進(jìn)的CTAB 提取方法進(jìn)行優(yōu)化,探討適宜的果肉冷凍干燥粉的量和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的添加量。最終確定加入0.10g 果肉冷凍干燥粉較為合適,提取緩沖液中PVP 添加1.0% 時(shí)效果較好。此方法有效的去除了水果果肉中多酚和多糖類物質(zhì)的影響,提取出的DNA 濃度較高,A260/A280 值介于1.80~2.00 之間。通過比較,改進(jìn)的CTAB 法優(yōu)于SDS 法和DNA 提取試劑盒法。以所提取出的木瓜、哈密瓜、香蕉、梨果肉總DNA 為模板,對(duì)內(nèi)源rbcL 基因進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,均得到了433bp 大小的目的條帶。

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