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木瓜蛋白酶具有水解殼聚糖活性的酶組分分離純化
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 167 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陳季旺,譚 晶,夏文水
關(guān)鍵詞: 木瓜蛋白酶|殼聚糖酶活力|超濾|制備電泳|高效液相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)
摘要:

采用超濾、制備電泳對(duì)木瓜蛋白酶進(jìn)行分離純化。結(jié)果顯示:超濾后木瓜蛋白酶的蛋白酶和殼聚糖酶比活力分別從435.10U/mg 和2.17U/mg 提高到531.39U/mg 和2.65U/mg,純化倍數(shù)均提高了1.22 倍。制備電泳圖譜上顯示有五條明顯的酶條帶,酶活性測(cè)定顯示條帶2 具有較高的殼聚糖酶比活力。采用SDS-PAGE 和HPLC 對(duì)此純化酶組分進(jìn)行純度鑒定,結(jié)果顯示為單一條帶和單一峰,說(shuō)明木瓜蛋白酶中存在具有水解殼聚糖活力的酶組分。HPLCMS/MS 測(cè)定該純化酶組分的氨基酸序列為 MRITISGSPG SGTTTLGRSI AEKYSYRYVS AGEVFRGLAKERNMDLAAFG KIAETDPAID LEIADARQKEI GESSDDIILE GRLAGWMVEN ADLKILLCAS PECRSTRIAAREGLTEKQAF EMTIEREACE AGRYMEYYEI DILDFSPYDL ILNSETFSAN ELFAIVDAAV SSLLKRE。

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