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重組彈性蛋白酶誘導表達、純化及酶學特性研究
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 150 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 谷新晰,許文濤,黃昆侖,羅云波,林希謹,陳卓君,田洪濤 , ,*
關鍵詞: 彈性蛋白酶|誘導表達|純化| 酶學特性
摘要:

將已構建好的表達載體pPIC3.5K/PAE轉化畢赤酵母KM71, 經(jīng)甲醇誘導表達彈性蛋白酶, 通過對發(fā)酵條件的初步優(yōu)化, 確定畢赤酵母重組菌株表達的最佳條件為:裝填量10%, 培養(yǎng)基為BMMY, 甲醇濃度為1%。通過DEAE-Sepharose FF弱陰離子交換柱一步純化, 獲得良好的純化效果。該重組蛋白酶最適pH范圍為6.0~8.5, 最適溫度范圍為25℃~40℃, 催化反應條件溫和。Ca2+和Mg2+對重組彈性蛋白酶活性有不同程度的促進作用,Zn2+,Cd2+,Mn2+, Fe2+, Co2+, Cu2+和EDTA對該酶有不同程度的抑制作用。

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