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Taqman MGB PCR定量檢測水產(chǎn)品中沙門氏菌的方法建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 麻麗丹,王殿夫,巴中華,李春麗
關(guān)鍵詞: 實時熒光PCR|定量檢測|沙門菌|fimY基因|Taqman MGB探針|水產(chǎn)品
摘要:

建立采用Taqman MGB實時熒光PCR法快速定量檢測水產(chǎn)品中沙門氏菌。根據(jù)沙門氏菌fimY基因保守序列,設(shè)計引物和Taqman MGB探針,建立Taqman MGB實時PCR定量檢測體系。采用本方法對24株共14種血清型沙門氏菌和17株與沙門氏菌親緣關(guān)系比較近,以及在樣品中能同時存在的常見食源性致病菌菌株進行PCR擴增。結(jié)果顯示:所有的沙門氏菌菌株結(jié)果均為陽性,而非沙門氏菌菌株檢測結(jié)果均為陰性,反應(yīng)特異性為100%。本方法的純菌最低檢測低限為13CFU/ml,樣品江瑤貝和蜆子肉中添加腸炎沙門氏菌的最低檢測低限為130CFU/ml;香螺肉中添加腸炎沙門氏菌的最低檢測低限為1300CFU/ml。定量關(guān)系式為y=-3.381418lnx+45.115715,R2= 0.964878。整個實驗2h即可完成,可應(yīng)用于水產(chǎn)品中沙門氏菌污染狀況調(diào)查及快速檢測。

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