領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：以5'-CCGAAGCTGC-3'為引物，利用隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(random amplified polymorphic DNA，RAPD)對(duì)沙門氏菌屬的幾種菌株進(jìn)行擴(kuò)增，以確定RAPD的最終優(yōu)化條件。方法：首先選用25μl體系PCR和50μl體系PCR做對(duì)比，以確定進(jìn)行RAPD實(shí)驗(yàn)最佳的PCR體系。其次進(jìn)行PCR反應(yīng)體系條件的優(yōu)化，對(duì)PCR復(fù)性溫度、引物濃度、Mg2+濃度進(jìn)行條件優(yōu)化。最后對(duì)初步確定的優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行不同瓊脂糖膠濃度梯度的優(yōu)化以確定RAPD的最終優(yōu)化條件。結(jié)果：RAPD優(yōu)化條件為PCR復(fù)性32℃，25mmol/L Mg2+溶液體積2.0μl，10μmol/L引物體積0.2μl，瓊脂糖膠濃度1.0%。結(jié)論：在優(yōu)化條件下，以引物5'-CCGAAGCTGC-3'對(duì)沙門氏菌屬的3種標(biāo)準(zhǔn)菌株，9株食品分離株進(jìn)行擴(kuò)增，得到的電泳條帶最多，且最清晰。
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