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慶大霉素免疫親和柱的制備及測定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 116 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 李 哲,胡擁明,張柳偉,劉麗強(qiáng),陳 偉,王利兵,胥傳來*
關(guān)鍵詞: 慶大霉素|多克隆抗體|間接競爭酶聯(lián)免疫法|免疫親和柱
摘要:

建立慶大霉素殘留的間接競爭ELISA 檢測方法及其用于樣品處理的免疫親和柱的制備。結(jié)果表明:ELISA方法的IC50 為3.8ng/ml,線性范圍為0.1~25ng/ml(R2 = 0.99),檢測限為0.1ng/ml;用該抗體做的免疫親和柱使用條件進(jìn)行了探索,表明當(dāng)洗脫液為70% 甲醇- 磷酸鹽緩沖液(7:3,V/V),體積為5ml 時(shí),可以達(dá)到最佳的洗脫;利用慶大霉素標(biāo)準(zhǔn)品建立了HPLC 測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線,測得吸附率均在90% 以上,回收率均在60% 以上,可以重復(fù)使用大約5 次左右,說明該免疫親和柱的靈敏性和可靠性。

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