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恩諾沙星快速酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒的研制
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 131 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 陳雪嵐,金 晶,楊曉慧
關鍵詞: 恩諾沙星|酶聯(lián)免疫吸附法|單克隆抗體
摘要:

目的:研制恩諾沙星酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒。方法:采用EDC-NHS 法制備ENR-M-BSA 免疫原和ENR-OVA 檢測抗原,用ENR-M-BSA 免疫BALB/C 小鼠,采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)基法篩選單克隆抗體并采用間接競爭ELISA 對其進行分析。結果:通過公式計算ENR-M-BSA 摩爾偶聯(lián)比為15:1,ENR-OVA 摩爾偶聯(lián)比為7.2:1。篩選出1 株特異性分泌株3E9,其腹水純化后間接競爭ELISA 測其效價為107,分型試劑盒測試顯示此抗體屬于IgG1 型;檢測限為1ng/mL,線性范圍在1~100ng/mL 之間,半量抑制濃度(IC50 值)為10ng/mL,與4 種結構類似物交叉反應均小于1%。結論:此株單克隆抗體可以用來建立恩諾沙星ELISA 檢測試劑盒。

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