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一種5 重real-time PCR篩查轉(zhuǎn)基因水稻方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 223 發(fā)表時間: 2021-12-31
作者: 董立明,楊帆,邢珍娟,李蔥蔥,閆偉,龍麗坤,李飛武
關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)基因水稻;篩查元件;單一實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);5 重實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);高通量檢測方法
摘要:

以轉(zhuǎn)基因水稻中最常用的CaMV35S啟動子、NOS終止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻內(nèi)標(biāo)基因為研究對象,利用5 種不同的熒光信號(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)進行多重實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)檢測方法的研究。通過引物組合篩選、反應(yīng)體系優(yōu)化、特異性測試、靈敏度測試、適用性測試等一系列實驗,建立了5 重real-time PCR方法,靈敏度可達0.032%。此方法具有靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、通量大等優(yōu)點,可實現(xiàn)水稻中轉(zhuǎn)基因成分的快速、高效檢測。

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