領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)XG24 發(fā)酵液中純化到β- 半乳糖苷酶，并對酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究，利用硫酸銨分級鹽析、DEAE-Sepharose Fast Flow 陰離子交換層析和Sephadex G-75 分子篩凝膠過濾層析等方法進(jìn)行分離純化。結(jié)果表明：經(jīng)過系列步驟純化后，酶純度提高了54.5 倍，回收率20.4%，酶比活力達(dá)32.7U/mg。以鄰- 硝基酚-D- 半乳糖吡喃糖苷(ONPG)為底物，研究β- 半乳糖苷酶的酶學(xué)性質(zhì)。最適pH6.5，最適作用溫度65℃。此菌株產(chǎn)β- 半乳糖苷酶在70℃以下和pH4.0～8.0 范圍內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性；Mg2+、Mn2+、Fe2+和Co2+ 對此酶有明顯激活作用，而Cu2+、Ag+、Hg2+ 幾乎完全抑制酶活性。以O(shè)NPG 為底物酶的Km 值為4.32mmol/L。SDS-PAGE 和凝膠過濾層析測得酶蛋白為單肽鏈蛋白，表觀分子質(zhì)量64kD。因此，嗜熱脂肪芽孢桿菌XG24 β- 半乳糖苷酶在乳制品工業(yè)中具有潛在的應(yīng)用價值。
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