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應(yīng)用PCR技術(shù)快速測定食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌毒力
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 145 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 于豐宇,李 林,王 紅,王文斟,何 源,劉曉朋,凌 華
關(guān)鍵詞: 單核細(xì)胞增生李斯特菌|毒力|基因|聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
摘要:

目的:采用PCR 技術(shù)準(zhǔn)確、快速測定單核細(xì)胞增生李斯特菌(單增李斯特氏菌)分離株的毒力基因,鑒別強(qiáng)毒株和弱毒株或無毒株,以有效地限制李斯特氏菌病的傳播。方法:以單增李斯特氏菌相關(guān)毒力基因(hly、plcB、inlA、inlB、inlC、inlJ、prfA)設(shè)計(jì)引物,檢測重慶市2007 - 2009 年分離的40 株單增李斯特氏菌分離株中的毒力基因攜帶率,并進(jìn)行小鼠毒力實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:40 株分離株中有15 株7 種毒力基因檢測結(jié)果均為陽性,6 株hly 基因陰性,4 株plcB 基因陰性,4 株prfA 基因性,5 株inlA、inlB 基因陰性,11 株inlC 基因陰性,9 株inlJ基因陰性,1 株inlA、inlB、inlC、inlJ 基因均為陰性。4 株分離株的毒力與標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC191161E 相當(dāng),小鼠LD50 在1.2 × 108~6.0 × 108CFU/mL 之間,為強(qiáng)毒株。篩選出弱毒株09-132,LD50 為1.7 × 1011CFU/mL。結(jié)論:重慶市存在發(fā)生李斯特菌食物中毒的潛在危險(xiǎn),內(nèi)化素基因(inlA、inlB、inlC、inlJ)的缺失可能是導(dǎo)致菌株毒力降低的原因,而prfA 和plcB 基因與菌株毒力的相關(guān)性較小。

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