領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
本實(shí)驗(yàn)從廣西紅樹林土壤中篩選出一株產(chǎn)木聚糖酶的耐堿菌HSL38，經(jīng)過16S rDNA鑒定，其與堿性芽孢桿菌Bacillus halodurans C-125(GenBank：NC_002570.2)的同源性達(dá)到99%。參考Bacillus halodurans C-125的β-1,4-木聚糖酶基因xynA設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增出HSL38中的β-1,4-木聚糖酶基因xyl-BH-G10，其與xynA的同源性達(dá)到99%，編碼396個(gè)氨基酸殘基(45.27kD)，屬于糖基水解酶GH10家族。將xyl-BH-G10基因與表達(dá)載體pET-30a-c(+)連接，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)化大腸桿菌E.coli BL21(DE3)，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白。結(jié)果表明，在最佳誘導(dǎo)條件下，木聚糖酶基因xyl-BH-G10在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)，酶活力達(dá)到55.28U/mL，是原菌株HSL38發(fā)酵液酶活力的4倍。
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