領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
通過(guò)化學(xué)修飾合成吡蟲(chóng)啉(imidacloprid，IMI)人工半抗原，采用碳二亞胺法(EDC)將該抗原與牛血清蛋白和卵清蛋白偶聯(lián)成功制備分子結(jié)合比合理的免疫抗原(IMI-BSA)和包被抗原(IMI-OVA)。對(duì)經(jīng)IMI-BSA免疫的6周齡Balb/c實(shí)驗(yàn)鼠的免疫抗血清進(jìn)行間接酶聯(lián)免疫吸附和阻斷酶聯(lián)免疫吸附，初步探明抗吡蟲(chóng)啉多克隆抗體(IMI-pAb)的免疫學(xué)特性。在此基礎(chǔ)上，采用聚乙二醇(PEG)介導(dǎo)細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行了免疫鼠脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，通過(guò)陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞篩選和克隆化培養(yǎng)，獲得3C8雜交瘤細(xì)胞株。結(jié)果顯示：該3C8雜交瘤細(xì)胞株具有高效價(jià)、高親和力和強(qiáng)特異性的特點(diǎn)；通過(guò)方陣滴定法確定最佳抗原包被濃度和最佳抗體稀釋倍數(shù)，建立基于吡蟲(chóng)啉單克隆抗體(IMI-mAb)的IMI殘留阻斷酶聯(lián)免疫吸附，其線性范圍為7.48×10-6～3.24×10-4mg/mL(R2=0.9928)，最低檢測(cè)限為8.00×10-6mg/mL。
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