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催化光度法測定三聚氰胺脫氨酶活性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 174 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 季艷偉,許 楊*,黃志兵,涂 追
關(guān)鍵詞: 三聚氰胺脫氨酶|酶活性測定|分光光度法
摘要:

建立一種測定三聚氰胺脫氨酶活性的催化光度法。利用Berthelot顯色反應(yīng),通過測定單位時(shí)間內(nèi)釋放出的氨氣量推算三聚氰胺脫氨酶的活性,并通過單因素試驗(yàn)和L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)化測定條件。結(jié)果表明:最佳顯色條件為水楊酸顯色液加入量1.2mL、次氯酸鈉溶液加入量0.3mL、顯色反應(yīng)時(shí)間40min、測定波長650nm;最佳酶促反應(yīng)條件為三聚氰胺底物加入量0.2mL、粗酶液加入量60μL、酶促作用時(shí)間30min;在上述條件下,測得酶比活力為132.41U/L,批內(nèi)批間變異系數(shù)范圍分別為0.81%~1.19%和1.27%~1.69%。催化光度法對三聚氰胺脫氨酶酶活的測定,具有操作快速簡便、靈敏度高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。

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