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—— 中國食品雜志社
以牛胰蛋白酶為原料，通過紫外吸收光譜、熒光發(fā)射光譜和圓二色譜研究尿素對天然胰蛋白酶和經(jīng)動態(tài)高壓微射流(DHPM)誘導(dǎo)去折疊胰蛋白酶的構(gòu)象變化。結(jié)果顯示：天然胰蛋白酶構(gòu)象在尿素濃度4.0～6.0mol/L之間變化最顯著，紫外吸光度從0.2746降至0.1824，吸收峰從波長279nm紅移至283nm，相對熒光強度從105.9降至98.27，發(fā)射峰從波長352nm紅移至355nm，β-折疊含量從46.9%降至30.6%；而去折疊胰蛋白酶構(gòu)象在尿素濃度2.0～4.0mol/L之間變化最顯著，紫外吸光度從0.3121降至0.2159，吸收峰從波長281nm紅移至283nm，相對熒光強度從108.24降至99.07，發(fā)射峰從波長353nm紅移至360nm，β-折疊含量從40.6%降至38.9%。表明尿素對經(jīng)DHPM處理后處于部分去折疊胰蛋白酶構(gòu)象的影響更為顯著。不同濃度尿素導(dǎo)致胰蛋白酶產(chǎn)生不同構(gòu)象的中間體，表現(xiàn)出“熔球態(tài)”模型特征。
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