領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
采用殼聚糖絮凝和戊二醛交聯(lián)的方法，對表達生產(chǎn)Thermobifida fusca葡萄糖異構(gòu)酶(GIase)的重組大腸桿菌細胞進行固定化工藝研究，以期獲得高性能和低成本的固定化產(chǎn)酶細胞方法。考察影響細胞絮凝和交聯(lián)的各種因素，并對固定化酶制劑的理化性質(zhì)、動力學(xué)常數(shù)進行測定。結(jié)果表明：最佳的固定化條件為在高密度發(fā)酵液中添加0.6%硅藻土和5mmol/L Mg2+，經(jīng)60℃熱處理30min后，在殼聚糖終質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1‰、pH5.5、充分?jǐn)嚢钘l件下絮凝，酶活回收率達98%；絮凝產(chǎn)物在戊二醛體積分?jǐn)?shù)0.25%、pH6.5、輕微攪拌條件下交聯(lián)3h，以未交聯(lián)的樣品作參照(100%)，交聯(lián)樣品的酶活保留率達80%。相對于游離GIase，此條件下制備的固定化GIase的最適溫度仍為80℃、最適pH值從10降低至9；在工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用條件下，固定化GIase的初始酶活力達到356U/g，半衰期為61d，能夠滿足高果糖漿工業(yè)的生產(chǎn)要求。
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