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韭菜酸性磷酸酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 123 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 孫 芳,任美鳳,胡瑞斌,唐云明
關(guān)鍵詞: 韭菜;酸性磷酸酶;分離純化;性質(zhì)
摘要:

取新鮮韭菜,通過(guò)勻漿、緩沖液抽提、硫酸銨分級(jí)沉淀、CM-Sepharose離子交換層析、Superdex-200凝膠過(guò)濾層析等方法純化,獲得韭菜中所含的一種電泳純的酸性磷酸酶(ACP)。經(jīng)純化后的酶溶液比活力為645.83U/mg,純化倍數(shù)達(dá)到454.81倍,回收率為10.50%。酶學(xué)性質(zhì)研究表明:該酶的分子質(zhì)量約為58.97kD;最適反應(yīng)溫度和pH值分別為65℃和5.4;該酶對(duì)對(duì)硝基苯磷酸二鈉(pNPP)的Km值為0.896×10-3mol/L;較高濃度的Mg2+、Mn2+對(duì)該酶的激活作用更強(qiáng);抗壞血酸、甲醇、乙醇、氯仿、異丙醇、Cu2+、Ag+的濃度越大,對(duì)該酶的抑制作用越強(qiáng)。

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