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產(chǎn)低溫彈性蛋白酶菌株的高效誘變及酶學(xué)特性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 144 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 樊 陳,王茂廣,高兆建,杜永凱,王東星,周 剛
關(guān)鍵詞: 彈性蛋白酶;復(fù)合誘變;突變株;酶學(xué)特性
摘要:

以實(shí)驗(yàn)室保藏的一株產(chǎn)低溫彈性蛋白酶短芽孢桿菌Bacillus brevis XZE116為原始出發(fā)菌株,通過紫外線、亞硝基胍(NTG)復(fù)合誘變,經(jīng)彈性蛋白平板水解圈初篩、搖瓶發(fā)酵復(fù)篩,成功篩選出一株高產(chǎn)突變菌株XZU21,其活力是出發(fā)菌株的1.67倍,最大產(chǎn)酶量160.3U/mL。10次傳代實(shí)驗(yàn)表明遺傳穩(wěn)定性好。突變菌株最佳反應(yīng)pH值為9.5,溫度20℃,比原始菌株低5℃。該菌株所產(chǎn)彈性蛋白酶50℃以下及pH7.0~11.5之間穩(wěn)定性好;Mg2+對酶有明顯激活作用,Pb2+、Hg2+幾乎完全抑制酶活性。絲氨酸蛋白酶特異性抑制劑苯甲基磺酰氟(PSFM)強(qiáng)烈抑制酶活性,表明該突變菌株彈性蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶。紫外線和NTG復(fù)合誘變對提高短芽孢桿菌彈性蛋白酶產(chǎn)量及降低最適反應(yīng)溫度效果顯著。

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