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噬菌體展示技術篩選可特異結合阪崎腸桿菌的多肽
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 135 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 屈 瑋,袁靜靜,朱威東,汪明明,劉 健
關鍵詞: 阪崎腸桿菌;噬菌體展示;特異性多肽
摘要:

利用噬菌體展示七肽庫,通過優(yōu)化篩選條件,得到阪崎腸桿菌的特異結合多肽。經(jīng)過4輪篩選,得到的噬菌體單克隆進行測序,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)鑒定陽性單克隆,并評價陽性單克隆的特異性。結果表明:優(yōu)化吐溫-20體積分數(shù)、結合時間和洗脫時間,提高了篩選效率,有助于獲得結合肽共有序列;ELISA法鑒定出一個與阪崎腸桿菌特異結合的陽性單克隆E2,編碼七肽序列QNDGTPR;特異性實驗結果表明:E2與其他4株參考菌株細菌沒有顯著結合力,具有良好的特異性。綜上,利用噬菌體展示技術,可成功篩選到阪崎腸桿菌特異結合多肽QNDGTPR。

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