領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性（randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）法對西藏地區(qū)牦牛奶酪中27 株乳酸菌基因型進(jìn)行同源性分析。方法：利用5 個隨機(jī)引物對Mg2+濃度、dNTP用量、退火溫度、模版用量/引物用量（ng/pmol）4 個條件做單因素梯度試驗(yàn)，建立最佳反應(yīng)條件，篩選最佳引物，然后對27 株乳酸菌和4 株乳酸菌標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增，用NTsys 2.10e軟件對擴(kuò)增條帶進(jìn)行聚類和遺傳相似性系數(shù)分析，分析結(jié)果與16S rRNA測序得到的菌種鑒定結(jié)果進(jìn)行對比。結(jié)果：31 株菌遺傳相似系數(shù)在0.72～1.00之間，當(dāng)相似性系數(shù)在0.82時，菌株被分成了8 組，菌株按照不同種屬聚類，聚類結(jié)果同16S rRNA測序結(jié)果基本一致，同時成功將Lactobacillus casei和Lactobacillus paracasei兩個亞種區(qū)分開。結(jié)論：RAPD技術(shù)可以較好地應(yīng)用于西藏地區(qū)牦牛奶酪中乳酸菌親緣性關(guān)系分析。
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