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基因工程菌Escherichia coli BL21/pET-pel重組果膠酶的純化及酶學(xué)性質(zhì)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 177 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 徐 偉,姚曉靜,付大偉
關(guān)鍵詞: 重組果膠酶;胞內(nèi)酶;鎳離子親合層析;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

采用超聲波破碎法、鎳離子親合層析柱法,純化重組菌Escherichia coli BL21/pET-pel表達(dá)的胞內(nèi)重組果膠酶,并用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide pelelectrophoresis,SDSPAGE)檢測(cè),研究純化的重組果膠酶酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明:重組果膠酶純化倍數(shù)為1.71,回收率為88.5%,分子質(zhì)量約為44 kD。最適pH值為9.0~9.5,在pH 7.0~10.0之間催化性質(zhì)較穩(wěn)定;最適作用溫度范圍為45~55 ℃,在60 ℃下保溫30 min還剩余40%的酶活力;在離子濃度為1 mmol/L時(shí),Ca2+和Co2+對(duì)該酶有較強(qiáng)的促進(jìn)作用,而Fe2+則對(duì)其有較強(qiáng)的抑制作用。

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