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β-1,3-1,4-葡聚糖酶高產(chǎn)菌誘變選育及基因克隆表達(dá)
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 154 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陳 計(jì)，高 鵬，陸兆新，呂鳳霞，張 充，趙海珍，別小妹
關(guān)鍵詞: 高地芽孢桿菌；β-1,3-1,4-葡聚糖酶；亞硝基胍誘變；低能N+束注入；異源表達(dá)
摘要:

為獲得β-1,3-1,4-葡聚糖酶高產(chǎn)菌株，以高地芽孢桿菌YC-9為出發(fā)菌株，通過亞硝基胍（nitrosoguanidine，NTG）和低能N+束誘變育種，篩選和選育得到兩株突變株N-2-2和10-30s-3，發(fā)酵培養(yǎng)60 h，酶活力分別達(dá)到28.6 U/mL和36.1 U/mL，分別是出發(fā)菌株的2.36 倍和2.98 倍，與YC-9菌株相比，突變菌株菌體生長下降但發(fā)酵產(chǎn)酶量增加。進(jìn)一步將β-1,3-1,4-葡聚糖酶克隆并在大腸桿菌中成功表達(dá)，經(jīng)過30 ℃誘導(dǎo)6 h后，胞內(nèi)酶活力達(dá)79.2 U/mL，為出發(fā)菌株的6.5 倍。

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