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α-淀粉酶在不同地衣芽孢桿菌宿主菌中分泌表達(dá)的對(duì)比分析
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 162 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陳敬幫,周銀華,趙新宇,陳守文,魏雪團(tuán)
關(guān)鍵詞: α-淀粉酶;地衣芽孢桿菌;宿主菌;分泌表達(dá)
摘要:

研究不同地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)宿主菌對(duì)α-淀粉酶分泌表達(dá)的影響。以Bacillus subtilis的P43啟動(dòng)子,B. licheniformis WX-02 α-淀粉酶基因的信號(hào)肽、編碼區(qū)和終止子序列為表達(dá)原件,構(gòu)建了α-淀粉酶分泌表達(dá)載體pP43SAT。將pP43SAT分別轉(zhuǎn)入3 株B. licheniformis宿主菌:WX-02(δamyL)、BL9和BL10,獲得3 株α-淀粉酶基因工程菌WX-02(δamyL,pP43SAT)、BL9(pP43SAT)和BL10(pP43SAT),并將構(gòu)建的3 株工程菌進(jìn)行發(fā)酵對(duì)比分析。BL9(pP43SAT)和BL10(pP43SAT)的淀粉酶發(fā)酵活力分別達(dá)到94.01 U/mL和101.94 U/mL,比原始宿主菌WX-02(δamyL,pP43SAT)分別提高了21%和31%,這說(shuō)明BL9和BL10新型宿主菌有利于淀粉酶的分泌表達(dá)。本研究證明多蛋白酶基因缺失可顯著提高α-淀粉酶的表達(dá),為α-淀粉酶的高效表達(dá)提供了新型宿主菌和新策略。

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