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枯草芽孢桿菌木聚糖酶的克隆表達及其酶解兩種木聚糖的產(chǎn)物分析
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 123 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 韋露莎,吳一飛,陳 輝
關鍵詞: 木聚糖內(nèi)切酶;低聚木糖;基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜
摘要:

通過基因克隆方法獲得枯草芽孢桿菌木聚糖酶XynA,考察經(jīng)鎳離子親和柱純化后的XynA分別在樺木木聚糖和毛櫸木木聚糖中的酶解情況,利用薄層色譜法(thin layer chromatography,TLC)及基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/MS)法鑒定木聚糖酶XynA的酶解產(chǎn)物。運用MALDI-TOF/MS分析枯草芽孢桿菌木聚糖酶XynA酶解樺木木聚糖和毛櫸木木聚糖產(chǎn)物不同的聚合度寡糖的分布情況。結果表明:在樺木木聚糖酶解液中,產(chǎn)生的中性木寡糖主要為木二糖(X2)和木三糖(X3),酸性木寡糖聚合度為4~12,并且每一個酸性木寡糖上僅連接著一個甲基葡萄糖醛酸側鏈(MeG)。在毛櫸木木聚糖酶解液中,產(chǎn)生的中性木寡糖與在樺木木聚糖酶解液中相同,酸性木寡糖的結構相似,聚合度為4~16。因此木聚糖酶XynA具有生產(chǎn)木二糖(X2)和木三糖(X3)以及酸性木寡糖(MeGXn)的功能。

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