領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
根據(jù)沙門(mén)氏菌invA基因序列設(shè)計(jì)特異性引物，利用Midori Green新型核酸熒光染料，建立了沙門(mén)氏菌實(shí)時(shí)熒光定量環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法。結(jié)果表明，檢測(cè)過(guò)程僅需45 min，靈敏度達(dá)6 CFU/管，而且細(xì)菌數(shù)量對(duì)數(shù)值（lg（CFU/管））與擴(kuò)增熒光指數(shù)增加時(shí)間（Tp值）具有良好正相關(guān)線性關(guān)系，R2為0.985 1。通過(guò)模擬沙門(mén)氏菌人工污染25 g雞肉樣品，經(jīng)37 ℃保溫4 h，提取樣品制備DNA模板用于實(shí)時(shí)熒光定量環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)，結(jié)果表明靈敏度達(dá)450 CFU/g，共需時(shí)約7 h。隨機(jī)從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)冷凍雞肉樣品21 份，采用國(guó)標(biāo)沙門(mén)氏菌檢測(cè)方法和雞肉樣品實(shí)時(shí)熒光定量環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)，結(jié)果兩種方法均檢測(cè)出同一份樣品為沙門(mén)氏菌陽(yáng)性，其余20 份樣品均為沙門(mén)氏菌陰性，表明本研究建立的雞肉沙門(mén)氏菌實(shí)時(shí)熒光定量環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)，其靈敏性和準(zhǔn)確性與國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法相當(dāng)，但檢測(cè)時(shí)間可縮短至7 h。
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