領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
以GenBank中報(bào)道的單增李斯特菌（Listeria monocytogenes，Lm）野生型菌株EGDe的nox基因（GenBankID：986631）為研究對(duì)象，探討在高等動(dòng)植物中普遍存在的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在Lm中是否也可以介導(dǎo)產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS）。首先通過(guò)誘導(dǎo)nox基因在BL21中表達(dá)產(chǎn)生Nox蛋白，利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和Western blot鑒定該蛋白質(zhì)分子質(zhì)量；然后構(gòu)建過(guò)表達(dá)菌株EGDe-nox，測(cè)定ROS產(chǎn)生情況，并使用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)nox基因的過(guò)表達(dá)對(duì)Lm毒力基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明，經(jīng)鑒定Nox蛋白分子質(zhì)量約為33 kD，過(guò)表達(dá)菌株EGDe-nox與對(duì)照組EGDe的ROS產(chǎn)生量相比并無(wú)多大變化，nox基因的過(guò)表達(dá)會(huì)導(dǎo)致與侵襲相關(guān)的基因actA、inlA和inlB以及毒力基因prfA的表達(dá)上調(diào)。由此推測(cè)，該Nox蛋白不能獨(dú)立主導(dǎo)ROS的產(chǎn)量，但其過(guò)表達(dá)卻可以增強(qiáng)毒力基因表達(dá)上調(diào)。本研究為繼續(xù)探討細(xì)菌中Nox的作用提供一定的參考依據(jù)。
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