領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
單核細(xì)胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes，Lm）是一種風(fēng)險(xiǎn)較高的食源性致病菌，其絕大多數(shù)毒 力基因的表達(dá)均受到由prfA基因編碼的PrfA（positive regulatory factor A）蛋白全部或部分調(diào)控。使用同源重組的方 法敲除Lm野生菌株EGDe的prfA基因，并通過(guò)測(cè)定生長(zhǎng)曲線(xiàn)、毒力基因表達(dá)和侵襲Caco-2細(xì)胞能力等探討單缺失菌 株EGDe-ΔprfA生物學(xué)特性。通過(guò)測(cè)定生長(zhǎng)曲線(xiàn)顯示prfA敲除株和野生型EGDe二者生長(zhǎng)狀態(tài)無(wú)差異；運(yùn)用實(shí)時(shí)定量 熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)EGDe-ΔprfA的主要毒力基因表達(dá)，結(jié)果顯示plcA、plcB毒力基因的表達(dá)量分別上升至原來(lái) 的2.5 倍和2 倍，inlA、inlB、inlC、actA、vip等均呈下降趨勢(shì)，prfA基因表達(dá)量趨向于零；侵襲Caco-2細(xì)胞結(jié)果顯示 EGDe-ΔprfA侵襲數(shù)為野生株的1/5。該基因缺失菌株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究對(duì)食源性致病菌EGDe致病機(jī)理研究具 有重要意義并且提供了重要材料。
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