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棉籽抗菌活性肽的分離純化及鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 180 發(fā)表時間: 2017-07-24
作者: 韓曉燕,包郁明,辛鳳姣,黃 穎,Christophe BLECKER,戴小楓
關(guān)鍵詞: 棉籽分離蛋白酶解產(chǎn)物;抗菌活性肽;分離純化;氨基酸序列
摘要:

通過體外模擬消化系統(tǒng)對棉籽分離蛋白(cottonseed protein isolate,CPI)進(jìn)行酶解,得到具有抗菌活性的酶解產(chǎn)物,并采用超濾(ultrafiltration,UF)、陰離子交換色譜(anion exchange chromatography,AEC)、半制備高效液相色譜(semi-preparation high performance liquid chromatography,semi-P-HPLC)分離技術(shù)對棉籽抗菌活性肽進(jìn)行分離純化,用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(electrospray ionization-tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)鑒定棉籽抗菌肽的氨基酸序列。在抗菌活性肽分離純化過程中,用UF對具有抗菌活性的CPI酶解產(chǎn)物進(jìn)行分離,得到3 個組分U-Ⅰ~U-Ⅲ。抗菌活性檢測表明U-Ⅲ的抗菌能力最強(qiáng);用AEC分離U-Ⅲ得到3 個組分QF-Ⅰ~QF-Ⅲ,其中QF-Ⅱ抗菌能力最強(qiáng);進(jìn)一步采用semi-P-HPLC分離QF-Ⅱ得到4 個組分PF-Ⅰ~PF-Ⅳ,其中PF-Ⅲ的抗菌能力最強(qiáng),經(jīng)HPLC檢測為單一峰,ESI-MS/MS檢測分析得到該肽的氨基酸序列為ISGLIYEETR(Ile-Ser-Gly-Leu-Ile-Tyr-Glu-Glu-Thr-Arg)。

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