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強烈熾熱球菌幾丁質(zhì)酶水解制備低脫乙酰度殼寡糖及其組成與結(jié)構(gòu)分析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 程功,焦思明,任立世,馮翠,康躋耀,杜昱光
關(guān)鍵詞: 強烈熾熱球菌|幾丁質(zhì)酶|殼寡糖|分子排阻高效液相色譜|基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜|核磁共振
摘要:

利用全基因合成方法合成了強烈熾熱球菌(Pyrococcus furiosus)的幾丁質(zhì)酶編碼基因并在大腸桿菌(Escherichia coli)中實現(xiàn)了可溶表達(dá)。利用該酶對低脫乙酰度殼聚糖進行水解并對獲得的殼寡糖產(chǎn)物進行組成及結(jié)構(gòu)分析。分子排阻高效液相色譜結(jié)果顯示,水解產(chǎn)物相對分子質(zhì)量分布范圍為1?000~5?000。基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜分析結(jié)果顯示,酶解產(chǎn)物中包含聚合度2~9、不同脫乙酰度的殼寡糖。核磁共振對酶解產(chǎn)物殼寡糖的結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果顯示,所有寡糖組分的還原端均主要由兩個連續(xù)的N-乙酰氨基葡萄糖組成。綜上,本研究利用來源于強烈熾熱球菌的幾丁質(zhì)酶制備了還原末端結(jié)構(gòu)確定的低脫乙酰度殼寡糖,為復(fù)雜結(jié)構(gòu)殼寡糖結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系研究提供了理論支持。

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